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鞍帶石斑魚利用EM菌進行工廠化育苗

時間:2013-07-20 13:50來源:EM益生菌-水產養殖 作者:祥運水產養殖 點擊:
用祥運EM菌育苗的方法中,育苗池中因為使用了祥運EM菌而存在豐富的微生物、微型浮游生物,成為了輪蟲、橈足類的餌料,保證后者不會因饑餓降低其作為石斑魚餌料的價值,有利于提高育苗成活率。
http://www.jwajqc.tw 河南祥運生物科技有限公司 技術QQ:996363923 訂購電話、微信號15237167538

     作者設計了一種新的鞍帶石斑魚(Epinephelus lanceolatus)工廠化人工育苗方法。測定了鞍帶石斑魚人工育苗過程中水環境因子和育苗水體浮游生物的種類、數量變化。育苗期間水溫28.0~30.7℃;鹽度為27.0~32.0;pH值為7.39~7.90;溶氧量6mg/L以上;中午池面平均光照3315.9lx;記錄了1d的光照、水溫、溶解氧和pH的變化;育苗池前18d只加水不換水,氨氮不斷上升,最低值0.24mg/L,最高值2.53mg/L,育苗后期采取換水措施,氨氮迅速下降;育苗期間,水體除正常投喂的輪蟲(Brachionus plicatilis)和橈足類外,池中出現浮游植物12種、浮游動物5種,浮游植物平均生物量6.92×106個/L,原生動物平均生物量0.74×106個/L。經過34d的培養,得到平均全長2.45cm魚種,單位水體育苗密度300尾/m3,育苗成活率為2.73%。結果表明,用有效微生物群(effective microorganisms,簡稱EM)+高級蝦片調節水質的模式,可以保持育苗水質穩定,成功培育出鞍帶石斑魚幼魚。

鞍帶石斑魚俗稱龍膽石斑魚,隸屬鱸形目、鮨科、石斑魚屬,為暖水性、中下層珊瑚礁魚類,分布于印度洋非洲東岸至太平洋中部密克羅尼西亞,東至澳大利亞,中國產于南海諸島和海南島等海域,但數量稀少。鞍帶石斑魚是石斑魚類中體型最大的種類,具有生長速度快,抗病性強,肉質鮮美等諸多優點,且肌肉氨基酸組成與人體氨基酸組成較為接近,營養價值高,成為養殖前景極大的石斑魚種類,深受消費者和養殖業的喜愛,由于人工繁殖技術尚不成熟,苗種不足限制了鞍帶石斑魚養殖的發展。
石斑魚育苗培育被認為是海水魚類育苗種難度較大的一種,而鞍帶石斑魚又有親魚獲取較難、產卵期短等問題,使人工繁殖更加困難。目前,學者們對于石斑魚育苗存在的問題達成了幾點共識:
首先,育苗水環境因子的變化時育苗成功與否的重要因素之一。第二,由內源性營養轉為外源性營養的仔魚開口期餌料不適宜,長棘期和收棘期的營養缺乏,均可導致高的死亡率。此外,由于育苗密度較高產生的局部缺氧和稚、幼魚期的互相殘殺也是育苗成功率低的重要原因。
目前,鞍帶石斑魚育苗多采用池塘生態育苗方式,鞍帶石斑魚在海南的注意產卵期是4—6月和 9—10月,前一個產卵期內,海南的池塘育苗中水溫經常達到32度以上,而這個水溫條件在鞍帶石斑魚的育苗早期仔魚很難度過;后一個產卵期是海南的臺風季節,臺風的影響經常導致池塘育苗失敗。可見,鞍帶石斑魚的池塘育苗受天氣制約,工廠化育苗可以在一定程度上克服受天氣制約的問題。鞍帶石斑魚的工廠化育苗相關報道比較少,作者曾采用單細胞藻類凈化水質的方法進行鞍帶石斑魚的育苗,但效果不穩定。為了改進鞍帶石斑魚的工廠化育苗方法,本實驗是通過向育苗池中定時定量加入祥運EM菌和高級蝦片,在育苗水體中構建一條碎屑食物鏈,保持育苗水體水質穩定,完成育苗過程,現將實驗總結如下。
1、材料和方法
1.1、育苗設施與材料
育苗實驗在海南某石斑魚育苗基地進行。
水源:海邊砂濾井過濾海水。
育苗池條件:室內水泥池,方形,規格為5m×5m×1m;設有上溢下排的排水口和池底排污口;全池設25只氣石充氣;育苗車間的房頂部分采用透光材料,設有遮光網,可調節室內光照強度,控制11:00—15:00育苗池水面光照強度為3000—5000Lx。
祥運EM菌:10L,清水20L,紅砂糖2kg,在50L聚乙烯桶內混勻密封備用。
蝦片:高級蝦片
生物餌料:用池塘培育的輪蟲、橈足類。
鞍帶石斑魚受精卵0.2kg。
1.2、育苗方法和水質管理
1.2.1、育苗前的準備與投放仔魚。
培水:育苗池在使用前用漂白粉消毒,沖洗至無余氯。加入海水至80cm深。育苗池進水當天開始,每天8:00、15:00分2次向池中潑灑準備好的祥運EM菌和蝦片,每次用量:培養的EM菌稀釋液400ml,蝦片30g。祥運EM菌直接向池中潑灑,蝦片用適量海水混合,搓碎,經150目篩絹過濾,取濾過部分向池中潑灑。
投放仔魚:培水至第4天,購鞍帶石斑魚受精卵0.2kg。孵化出仔魚后小心投放到育苗池,仔魚下池3小時候,抽樣測定密度為1.1萬尾/立方。
1.2.2、餌料投喂和水質管理
餌料投喂:仔魚孵出第2天,向育苗池中接種輪蟲,保持育苗水體輪蟲密度15—20個/ml。第14天開始,繼續投喂輪蟲外,投喂少量經80目篩絹過濾的橈足類幼體。第20天,以投喂橈足類為主,保持育苗水體橈足類密度5—10個/ml。
水質管理:仔魚下池后,第一周,不換水;第二周,每天向池中加水1—2cm;第三周每天換水3—8cm。第四周以后,根據育苗水質狀況,每天換水20—30cm。
1.2.3、育苗水體理化條件和浮游生物的測定
水溫、ph、鹽度、溶氧、光照強度:每天8:00、15:00二次測定。水溫、溶氧測定使用美國HACH HQ3OD flexi METER,鹽度測定試驗手持式折光鹽度計;ph測定用DELTA320臺式ph計,光照強度測定用DT-1301 LIGHT METER 測定水面照度。
氨氮測定:HACH DREL 2800 便攜式完全水質分析實驗室的方法。
浮游生物密度測定:育苗期間,每4天取樣測定一次輪蟲,橈足類以外的浮游生物密度。
1.2.4、魚苗生長的觀察和密度測定
每日兩次觀察記錄魚苗的活動狀況;每5日取樣一次,每次10—20尾,經固定后測量體長并描述主要形態特征。
石斑魚的密度測定,在夜間無光條件下,待魚苗在池中分散均勻,用500mL燒杯隨機取樣,估測密度。
2、結果分析
2.1、育苗期間理化因子和浮游生物的變化
2.1.1、育苗水體理化因子的變化及對育苗的影響
水溫和鹽度:育苗期間,水體溫度范圍在28.0—30.7度,鹽度27.0-32.0,魚苗生長發育正常。在育苗過程中,遇一次臺風,室外溫度驟降,因育苗車間的保溫作用,室內育苗水溫變化不大,沒有對育苗造成大的影響。育苗早期不換水,因蒸發鹽度有小幅上升趨勢,至育苗的第三周,因降水影響,海邊砂濾井的海水鹽度有所下降,此時對育苗池少量換水,鹽度有小幅下降,對育苗生長沒有明顯影響。
         育苗時間(天)                               育苗時間(天)
圖1:育苗水體中溫度和鹽度的變化            圖2:育苗水體中溶解氧的變化
 
溶氧:育苗水體采取不間斷充氣,水體溶氧在6mg/L以上,溶氧條件良好。
光照:育苗車間的光照變化很大,主要受天氣變化的影響,車間設置的日光燈,對實際光照影響不大,圖3 可以看出,育苗期間出現3次低光照情況。第一次在育苗的第4、5天,持續時間一天,正值仔魚從內源營養向外源營養的過渡期,從育苗的實際效果看,對育苗生長沒有產生大的影響;第二次遇到光照情況是在第15—17天(臺風影響),持續時間2天多,從池中育苗密度變化看,育苗受到一定影響;第三次是在育苗的第21—23天,池中出現一些死苗現象。
酸堿度:從圖4 可以看出,育苗水體酸堿度在ph7.39—7.90的范圍變化,隨著育苗進程,ph值有逐漸降低的趨勢。
環境因子的周日變化與魚苗活動規律:選定一個晴天,即在育苗的第13天,每隔2小時測定一次水溫、溶氧、光照、ph、以了解其變化規律(見圖1)。從總體看,僅光照取自然光,變化明顯,水溫、溶氧、ph相對穩定。此時鞍帶石斑魚苗背鰭和腹鰭都已經長出長刺,測量理化因子的同時,觀察了育苗的活動情況。6:00車間內光照109LX,魚苗胃內食物極少或沒有,開始從晚上的隨水漂浮轉為主動游泳,之后,出現身體向前竄動的攝食動作;8:00攝食動作明顯加強,魚苗腹部飽滿,以后整個白天,都有攝食動作,且腹部飽滿;至20:00,車間內光照強度為0,用燈光照射育苗池發現魚苗隨充氣造成的水流翻滾,無攝食動作,偶爾因燈光刺激而活動。
表 1:24小時育苗水體環境因子的變化

時間
水溫(℃)
溶解氧(mg/L)
Ph
光照強度(Lx)
6:00
30.4
6.96
7.62
109.0
8:00
30.4
6.79
7.59
1758
10:00
30.7
6.61
7.60
4870
12:00
31.1
6.58
7.61
5470
14:00
31.4
6.60
7.66
1186
16:00
31.4
6.56
7.62
584.0
18:00
31.1
6.49
7.73
168.9
20:00
31.0
6.53
7.7
0

 
2.1.2、水體氨氮含量變化及對魚苗生長的影響
育苗期間,4次測定了水體的氨氮含量,育苗第1天(水源)、第7天、第18天、第29天的氨氮含量分別是:0.24、0.47、2.53、0.97mg/L。從結果看,本方法進行育苗,水體氨氮含量不斷增高,第18天達到最高(因此此前不換水),以后隨著換水量增大,氨氮含量下降。第18天的氨氮含量達到2.53mg/L,魚苗活動并無明顯異常。
2.1.3、育苗水體浮游生物的測定
2.1.3.1、育苗水體浮游生物的種類組成
育苗第7天開始,每5天采樣一次,測定育苗池中輪蟲、橈足類以外的浮游生物種類(見表 2)。
 表 2 :育苗水體中出現的浮游生物種類

浮游生物種類
 出現的時間(或檢測出的時間)
浮游植物
第7天
第11天
第15天
第19天
1、小球藻
    2、微綠球藻
 
 
 
    3、菱形藻屬
 
 
 
    4、隱藻屬
 
 
    5、直鏈藻類
 
    6、原甲藻屬
 
 
 
7、等片藻類
 
 
    8、多甲藻類
 
 
 
    9、顫藻屬
 
 
 
    10、單鞭金藻屬
 
 
 
    11、新月藻屬
 
 
    12、藍色裸甲藻
浮游生物
 
 
 
 
     1、旋回俠盜蟲
 
 
     2、四膜蟲
 
 
     3、匕口蟲
 
 
 
     4、尾毛蟲
 
 
 
     5、異養鞭毛蟲
 

 
2.1.3.2、育苗水體中微型浮游生物量的變化
    育苗池換水之前,分4次取樣測定了除輪蟲、橈足類之外的浮游生物的生物量。第7天,浮游生物量5.77×106個/L,第11天4.36×106個/L,第15天7.71×106個/L,第19天9.85×106個/L。這些浮游生物由偶然因素進入育苗池,在育苗池中生長,構成了育苗池中生物的組成部分,并在育苗池中發揮作用。
2.2、育苗密度變化和育苗效果
育苗期間,4次測定了池中的魚苗密度。第1天(仔魚下池)密度11×103 尾/m3,第7天為10×103 尾/m3,第19天為2×103 尾/m3,第30天為0.3×103 尾/m3。隨著育苗時間的推移,育苗密度逐漸下降,復合石斑魚育苗的一般規律。
2.3、魚苗生長情況
2.3.1、初孵仔魚
剛孵化出膜的仔魚,身體前端有一個橢圓形半透明的卵黃囊,卵黃囊后部有一小油球,初孵仔魚由于油球的作用傾斜浮在水面上,偶爾垂直向上游動。
2.3.2、開口仔魚
放苗的第3天,觀察到卵黃囊明顯變小且接近消失,此時期仔魚由開始由內源性營養型向外源性營養型轉變,口部開始形成,出現胸鰭原基,在水中觀察可明顯看到仔魚頭部有兩個黑點,腹部、尾部各一個黑點,頭朝下浮于水中,已可在水中平游。用燒杯觀察時,可見仔魚用吻部用力的啄燒杯底部,有明顯的攝食行為,此時應保證水體中有足夠的適合仔魚攝食的餌料。
2.3.3、背棘和腹棘根芽出現
放苗的第7天,此時仔魚全長為0.250±0.02mm,背棘和腹棘根芽出現,頭部增高,消化管上部黑色素增大,在池中有聚群行為,喜獲在池角和邊緣活動,有趨光行為。用燒杯打起觀察,可明顯看到仔魚身體兩側長出一對翹狀鰭條,振動較快,黑色素加深,仔魚攝食能力增強,活力較好。
2.3.4、背鰭長棘和腹鰭長棘出現
放苗的第10天,此時全長0.350±0.01mm,背鰭位置上出現一枚長棘,棘上有黑色素分布,棘緣呈鋸齒狀,在身體兩側的腹鰭位置上也長出兩枚長棘,與背棘相似,魚體全身布滿粘液。用燒杯觀察,呈小三叉狀。魚苗在池中分布面積稍微擴大,但四角的分布密度仍然比較高,四壁稍低。主要在水中中上層活動。
2.3.5、背鰭、臀鰭、尾鰭鰭條形成。
放苗第23天,全長1.45mm,第二背鰭棘和腹鰭棘絕對長度達到仔稚魚階段的最大值。魚體頭部眼眶斜后上方色斑增多并有向胸鰭附近擴大之勢。第一背鰭和第二背鰭已連在一起,臀鰭第一鰭條變粗形成鰭棘,各鰭已基本形成。
放苗第34天,平均全長2.45mm,部分生長快的個體開始長出鱗片。此時,魚苗可以進入下一階段的標粗培育,實驗結束。
3、討論:
3.1、水環境因子對育苗的影響。
育苗水體溫度是育苗成功與否的關鍵水質指標。很多學者皆對育苗過程中水體適宜溫度進行論述與報道。本實驗中鞍帶石斑魚育苗期間測得水溫范圍在28—30.8℃,魚苗的發育正常。
育苗水體鹽度、溶氧量、ph值的變化范圍與斜帶石斑魚、點帶石斑魚等基本一致,表明鞍帶石斑魚育苗對這些因子的要求與其他石斑魚差異可能不顯著。
光照對育苗的影響,本次育苗遇到三次低光照情況,持續時間都不長,從育苗效果看,沒有造成大的影響。正常情況下,鞍帶石斑魚的育苗車間取自然光,育苗池水面光照4000—5000Lx是適宜的。
3.2、祥運生物EM菌+高級蝦片的生態育苗模式。
用本實驗的方法進行鞍帶石斑魚人工育苗,實際上在水體中建立了一條碎屑食物鏈:定時定量加入蝦片和祥運EM菌,利用微生物分解蝦片、各類生物的排泄廢物和殘體;這樣的育苗方法,育苗池中還會自然出現一些微型浮游生物(如原生動物);作為餌料投入的輪蟲可攝食微型浮游生物、單細胞藻類等;育苗后期作為餌料投入的橈足類,攝食微型浮游生物、輪蟲和藻類等;作為培育對象的石斑魚苗則攝食輪蟲、橈足類。用祥運EM菌解決了石斑魚育苗種幾個不易解決的問題:
1)、提供了石斑魚的開口餌料。石斑魚育苗的難點之一在于如何解決幼苗開口期的營養需求。本實驗利用水中出現的微型浮游生物(EM菌的功勞)作為仔魚開口餌料,開口效果良好。
2)、石斑魚育苗前兩周,因仔魚太小,對育苗池換水相當困難。用本實驗EM菌育苗方法,實際上市在育苗水體構建了一條碎屑食物鏈,物質和能量沿著食物鏈傳遞,微生物和藻類利用水體中溶解的無機鹽,避免無機鹽在水體中快速積累,從而保持水質相對穩定,達到育苗前兩周不換水的目的。但需要說明的是,這樣建立的育苗系統,并不是一個能夠自我維持的體系,只是在一定程度上保持相對穩定,一些指標還是在不斷上升,如NH3-N,NO2-N,COD等指標實際上也是在不斷上升的,只是用EM菌把上升的速度有所控制,并且能夠在兩周左右的時間內滿足石斑魚生長發育的需要,正好解決石斑魚育苗早期(前兩周)難于換水的問題。
之后,隨著育苗的生長,活動能力增強,可以通過對育苗池換水,解決育苗池水中無機鹽不斷上升的問題,使石斑魚育苗過程得以完成。
3)、輪蟲,橈足類作為石斑魚的餌料投入到育苗水體,當天不可能全部被魚苗攝食,總會存留一部分,本實驗用EM菌育苗的方法中,育苗池中因為使用了祥運EM菌而存在豐富的微生物、微型浮游生物,成為了輪蟲、橈足類的餌料,保證后者不會因饑餓降低其作為石斑魚餌料的價值,有利于提高育苗成活率。

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(責任編輯:祥運EM菌)
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